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單效濃縮器的蛋白質提取

點擊量:   發布時間:2024-11-14

    濃縮器蛋白質提取與制備蛋白質種類很多,性質上的差異很大,既或是同類蛋白質,因選用材料不同,使用方法差別也很大,且又處于不同的體系中,因此不可能有一個固定的程序適用各類蛋白質的分離。但多數分離工作中的關鍵部分基本手段還是共同的,大部分蛋白質均可溶于水、稀鹽、稀酸或稀堿溶液中,少數與脂類結合的蛋白質溶于乙醇、丙酮及丁醇等有機溶劑中。因此可采用不同溶劑提取、分離及純化蛋白質和酶。

    蛋白質與酶在不同溶劑中溶解度的差異,主要取決于蛋白分子中非極性疏水基團與極性親水基團的比例,其次取決于這些基團的排列和偶極矩。故分子結構性質是不同蛋白質溶解差異的內因。

溫度、pH、離子強度等是影響蛋白質溶解度的外界條件。提取蛋白質時常根據這些內外因素綜合加以利用。將細胞內蛋白質提取出來。并與其它不需要的物質分開。但動物材料中的蛋白質有些可溶性的形式存在于體液(如血漿、消化硫等)中,可以不必經過提取直接進行分離。蛋白質中的角蛋白、膠原及絲蛋白等不溶性蛋白質,只需要適當的溶劑洗去可溶性的伴隨物,如脂類、糖類以及其他可溶性蛋白質,昀后剩下的就是不溶性蛋白質。這些蛋白質經細胞破碎后,用水、稀鹽酸及緩沖液等適當溶劑,濃縮器將蛋白質溶解出來,再用離心法除去不溶物,即得粗提取液。

    水適用于白蛋白類蛋白質的抽提。如果抽提物的 pH用適當緩沖液控制時,共穩定性及溶解度均能增加。如球蛋白類能溶于稀鹽溶液中,脂蛋白可用稀的去垢劑溶液如十二烷基硫酸鈉、洋地黃皂苷(Digitonin)溶液或有機溶劑來抽提。其它不溶于水的蛋白質通常用稀堿溶液抽提


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